Paracoccidioidomicose  cerebral  -  focos múltiplos simulando metástases.  2. Colorações especiais
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Masc. 47 a.  Paciente com lesões cerebrais múltiplas simulando metástases (ver ressonância magnética).  Estudo de uma das lesões revelou tratar-se de paracoccidioidomicose.  Nesta página, Grocott em diferentes combinações com corantes de fundo e PAS.  Em outra, macroscopia da lesão e HE
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Destaques  da  microscopia. 
HE. Periferia da lesão - tecido fibroso, microabscessos, granulomas. Foto - microabscesso.  Fungos (Paracoccidioides brasiliensis) livres no tecido.  Fungos no citoplasma de gigantócitos, alguns em brotamento
Lesões vasculares Necrose coagulativa no centro da lesão  Margem de tecido nervoso gliótico - astrócitos gemistocíticos, macrófagos xantomatosos
Grocott.  Impregnação suave sem contracoloração, para detalhes morfológicos dos fungos Brotamento múltiplo em roda de leme ou em fileiras (seqüencial Grocott + hematoxilina. Contracoloração mostra relações entre fungos e células 
Grocott + HE Grocott + verde luz PAS + hematoxilina.
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COLORAÇÕES  ESPECIAIS
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Grocott simples suave. 

A impregnação argêntica de Grocott (para procedimento, clique) é talvez a técnica mais largamente empregada para pesquisa e demonstração de fungos em tecidos e esfregaços.  Chamamos Grocott 'suave' quando a impregnação a 60ºC  é acompanhada sob microscópio e interrompida quando os fungos começam a ser perceptíveis, geralmente após cerca de 10-15 minutos.  Com isso, conseguem-se tons intermediários que realçam detalhes morfológicos dos parasitas. 'Simples' refere à ausência de contracoloração. Na técnica habitual, a impregnação dura uma hora e os fungos aparecem como silhuetas negras, sem detalhes internos. 

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Brotamento múltiplo.  Característico do Paracoccidioides brasiliensis.  Dois ou mais fungos filhos brotam a partir de uma célula mãe. Quando há vários circundando a célula mãe no plano de corte, fala-se em 'roda de leme'. Ver mais exemplos em caso de paracoccidioidomicose linfonodal. 
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Brotamento seqüencial.   Usamos este termo quando uma célula filha origina outra, que origina outra em seqüência, por vezes formando uma pequena fileira de fungos filhos. Parte do brotamento pode ser delgado e alongado, simulando uma hifa (ou pseudohifa).
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Grocott  suave + hematoxilina. 

A contracoloração com hematoxilina permite visualização dos núcleos das células do tecido, e assim situar onde os fungos estão. 

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Grocott suave + HE.

A contracoloração com hematoxilina + eosina também pode ser usada. Ao lado, fungos no centro necrótico anucleado da lesão. 

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Grocott  suave + verde luz.

A contracoloração com verde luz (light green) não diferencia núcleos, citoplasma ou material intersticial, como colágeno. Quando o Grocott fica suave, os contornos dos fungos se destacam em marrom claro, e o interior fica pálido. Não raro, o protoplasma dos fungos se cora também pelo verde luz, permitindo discernir detalhes da arquitetura interna dos parasitas. 

Fragmentação da parede celular. 

Após a reprodução (brotamento múltiplo), a parede celular fica de espessura irregular, dividindo-se em  placas que lembram o aspecto de 'casca de tartaruga'. Para exemplos em outro caso, clique

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PAS.   Ao contrário do Grocott, que impregna a parede celular dos fungos, o PAS (que não é uma coloração, e sim uma reação histoquímica) (para procedimento, clique) cora o protoplasma (parte viva da célula), presumivelmente através da reação com grupos açúcar, como o glicogênio. A parede celular ('casca' do fungo) aparece incolor. 
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Agradecimento.  Caso do Hospital Santa Casa de Limeira, SP, gentilmente contribuído pelos Drs. Antonio Augusto Roth Vargas, Marcelo Senna Xavier de Lima e Paulo Roland Kaleff e residentes.  Colorações especiais pelo técnico Aparecido Paulo de Moraes. Depto de Anatomia Patológica, FCM-UNICAMP. 
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Para mais imagens deste caso: TC, RM HE Colorações especiais
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Para mais sobre paracoccidioidomicose (do curso de graduação).    Neuroimagem
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esfregaço, congelação
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Grocott
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