Neupatimagem-UNICAMP

Esclerose tuberosa. Túber cortical gigante.
5. Marcadores neuronais - SNF, NF, SMI-32

Masc. 1 a. 9 m. Clique para TC, RM, macro, HE, tricrômico de Masson, reticulina, LFB-Nissl, destaques da imunohistoquímica, GFAP, vimentina, MAP2, cromogranina, SNF, NF, SMI-32, CD34, Ki67.

Sinaptofisina. Botões sinápticos. Sinaptofisina (SNF), uma proteína associada a vesículas sinápticas (para breve texto, clique), decorou elegantemente muitos dos neurônios aberrantes encontrados neste túber, realçando o contorno celular. O citoplasma foi negativo, exceto em raras células. O achado demonstra que neurônios, embora muito anormais, eram contactados por terminais sinápticos, possivelmente de outros neurônios da lesão. É especulativo se participavam terminais axonais de células de outras áreas cerebrais e o quanto essas sinapses influíam na atividade epileptogênica.

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Sinaptofisina. Positividade citoplasmática. Poucas células tinham marcação citoplasmática para SNF, mas o achado não seria inesperado, pois a proteína é sintetizada no retículo endoplasmático rugoso das mesmas.

Sinaptofisina. Neurônios vacuolados. Neurônios com vacuolização citoplasmática comportavam-se de forma análoga aos não vacuolizados. A importância ou significado destes vacúolos nos é obscura. Há trabalho opinando que poderiam resultar de lisossomos anormais. Ver: Goto J. et al. Regulable neural progenitor-specific Tsc1 loss yields giant cells with organellar dysfunction in a model of tuberous sclerosis complex. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 Nov 8;108(45):E1070-9.

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Neurofilamento (NF). Proteína de neurofilamento, uma variedade de filamento intermediário do citoesqueleto expresso em neurônios, demonstrou o citoplasma dos neurônios aberrantes deste túber gigante da esclerose tuberosa. As células são agigantadas, com contorno irregular, dendritos espessos e sem orientação definida. Os aspectos assemelham-se aos obtidos com MAP2 e SMI-32.

NF. Neurônios gigantes.

NF. Células negativas. Astrócitos ? Admitimos que muitas das células não reagentes para NF corresponderiam a astrócitos. Algumas, porém, deixam dúvida, pois as feições citológicas são praticamente superponíveis às dos neurônios, sendo inclusive algumas vacuoladas. Em vista das aberrações grosseiras observadas na lesão, não é impossível que alguns neurônios pudessem não expressar NF. Variabilidade de expressão gênica não é novidade em tumores. Ver, por exemplo, um astrocitoma subependimário de células gigantes, de outro paciente com esclerose tuberosa, onde a expressão de GFAP e S-100 vai de forte a ausente em células vizinhas. Células de natureza duvidosa foram também observadas com HE e LFB-Nissl.

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SMI-32. SMI-32 é outro anticorpo contra proteína de neurofilamento, da variedade H (heavy) e não fosforilada (para breve texto, clique). Os resultados foram muito semelhantes aos com NF acima.

SMI-32.

SMI-32 (Sternberg Monoclonals Incorporated, product no. 32) é um anticorpo monoclonal de camundongo que reconhece um epítopo não fosforilado de uma proteína de neurofilamento pesada (200 kD) na maioria das espécies de mamíferos. Quando o epítopo é fosforilado a reação é mascarada. Em imunohistoquímica, permite visualização de corpos celulares e dendritos de neurônios, e alguns axônios espessos do sistema nervoso central e periférico, mas axônios finos não aparecem. Outras células e tecidos não reagem.

Neurofilamentos, que pertencem à família dos filamentos intermediários do citoesqueleto, usualmente contêm 3 subunidades proteicas L, M e H (light, medium, heavy), que estão envolvidos na manutenção do calibre neuronal. NF-H, que tem função importante em axônios maduros, tem várias repetições do tripeptídeo K-S-P (lisina-serina-prolina). Fosforilação de várias serinas nesta seqüência resultaria em ligações cruzadas entre os filamentos, importantes para a manutenção do calibre axonal. Admite-se que os níveis de fosforilação têm papel na função dos polipeptídeos maiores NF-M e NF-H.

Dados obtidos da bula do anticorpo do fabricante Abcam (www.abcam.com).

Literatura adicional - Ouda L, Druga R, Syka J. Distribution of SMI-32-immunoreactive neurons in the central auditory system of the rat. Brain Struct Funct (2012) 217:19–36.

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Agradecimentos. Caso estudado com o Prof. Dr. Fábio Rogério. Procedimentos imunohistoquímicos pelo pessoal do Laboratório de Pesquisa - Ana Claudia Sparapani Piaza, Luzia Aparecida Magalhães Ribeiro Reis e Arethusa de Souza. Depto de Anatomia Patológica da FCM-UNICAMP, Campinas, SP.

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Mais imagens deste caso:
TC, RM macro	Macro	HE, Masson, Reticulina	LFB - Nissl


GFAP, VIM	MAP2, cromogranina	SNF, NF, SMI-32	CD34, Ki-67