Nestina é um filamento intermediário próprio de células imaturas ou em rápida proliferação, e é descrita em vários tumores neurais, especialmente os gliomas de alto grau e os tumores primitivos ou pouco diferenciados. Para breves textos sobre nestina, e filamentos intermediários em geral, clique. 

Aqui, vemos expressão significativa no citoplasma das células neoplásicas deste PNET, com variação de intensidade conforme a área.  Parece haver preferência pelas ilhotas de células mais fusiformes, como já notado com outros antígenos, como GFAP, VIM e S-100. 

Nestina é uma proteína do grupo dos filamentos intermediários do citoesqueleto, expressa em vários tipos de células imaturas, embrionárias ou em rápida multiplicação, inclusive diversos tumores. O termo nestina deriva de neural stem cell protein.  Inicialmente considerada como marcador de células neurais imaturas, hoje é reconhecida em tecidos de diversas linhagens. 

Histórico. Nestina foi descoberta em 1985 em ratos, como um antígeno reconhecido pelo anticorpo Rat-401, obtido por imunização de camundongos com proteínas da medula espinal de embriões de ratos de 15 dias. O gene foi caracterizado em 1990 e é altamente conservado em ratos, camundongos e humanos. 

Classes de filamentos intermediários.  Atualmente, há mais de 50 proteínas de filamentos intermediários descritas, divididas em 6 classes com base em semelhanças em suas seqüências de aminoácidos.  Classes 1 e 2 correspondem às queratinas ácidas e básicas (células epiteliais);  classe 3 inclui vimentina (ubiquitária, inclusive várias células de linhagem mesenquimal), desmina (músculo), GFAP (glial fibrillary acidic protein, de astrócitos e células ependimárias), periferina (alguns neurônios); classe 4 – neurofilamentos e internexinas; classe 5 – laminas nucleares (forram internamente a membrana nuclear). A nestina é incluída na classe 6.  A importância prática dos filamentos intermediários é colaborar na identificação diferencial de linhagens de tumores por imunohistoquímica. Para texto sobre filamentos intermediários em geral, clique.

Bioquímica.  A nestina tem mais de 1600 aminoácidos e peso molecular de 198 kD.  Tem uma região N-terminal muito curta, o que a impede de formar homodímeros. Só pode formar heterodímeros com outros filamentos intermediários, como a vimentina e a alfa-internexina. O longo segmento C-terminal participa na interação dos filamentos intermediários com microfilamentos e microtúbulos.  Sugere-se que a nestina ajuda a estabilizar a estrutura celular e coordenar alterações na dinâmica intracelular, necessária em células em ativa divisão e migração. 

Nestina em células neurais.  A maioria dos autores considera a nestina como um marcador de células neurais tronco ou progenitoras. As evidências neste sentido são as seguintes: 

1) Nestina é observada em células no tecido nervoso do período embrionário. O número de células em divisão no cérebro dos mamíferos diminui muito logo após o nascimento. A proliferação continua apenas em duas regiões, que são a zona subventricular dos ventrículos laterais, e o giro denteado do hipocampo. Estas são chamadas zonas germinativas do cérebro, pois nelas acredita-se que a neurogênese continue após o nascimento, e atividade mitótica é notada ainda em indivíduos adultos. 

2) Nestina é expressada igualmente em células neuronais e gliais e em seus precursores comuns. 

3) Várias formas de lesão ao cérebro e medula espinal são seguidas por aparecimento de células imunopositivas para nestina. Sugere-se que isto envolve substituição de células mortas por novas, que contêm nestina. 

4) Vários tumores do sistema nervoso expressam nestina, entre eles neurocitomas, neuroblastomas, gliomas, inclusive o glioblastoma multiforme, astrocitomas, ependimomas, meduloblastomas e schwannomas. Estes tumores mostrariam a mesma expressão gênica que células indiferenciadas. 

Contudo, a nestina pode ser expressa em células diferenciadas, particularmente astrócitos, em áreas lesadas ou de gliose reacional.

Nestina no sistema nervoso embrionário.  Em embriões de ratos e camundongos, nestina é expressa em várias zonas proliferativas do sistema nervoso central, como as partes rostral e caudal do tubo neural, medula espinal, tronco cerebral e cerebelo, até alguns dias após o nascimento.  Na fase embrionária precoce, nestina está presente em células da glia radial, células da zona ventricular, em precursores comuns de neurônios e glia. Após a transição da fase proliferativa para o estado pós-mitótico, há um rápido decréscimo da quantidade de m-RNA da nestina. À medida que decresce a síntese da nestina, os filamentos intermediários definitivos, GFAP e neurofilamento, começam a ser expressos respectivamente nos astrócitos e neurônios em diferenciação. No cérebro adulto, nestina não é geralmente detectada, exceto nas áreas germinativas descritas acima. 

Nestina no sistema nervoso em reparo ou regeneração.  Após lesão ao SNC, ocorre a chamada neurogênese reativa, que corresponde à formação de novos neurônios e elementos gliais para substituir os que foram perdidos. Assim, a expressão de nestina é vista após vários estados patológicos, incluindo isquemia, trauma, inflamação, epilepsia, etc.  Células imunopositivas para nestina podem ser detectadas 6 horas após isquemia cerebral transitória focal com reperfusão. O nível máximo de expressão ocorre aos 7 dias e continua por 4 semanas. Na fase precoce pós isquemia, nestina pode ser detectada em astrócitos, oligodendrócitos e neurônios. Após isquemia total, a positividade é observada em células endoteliais de capilares cerebrais, células ependimárias e astrócitos reativos. 

Nestina em outros tecidos.  A nestina tem sido demonstrada em muitos tecidos fora do encéfalo e medula espinal, incluindo retina, músculos esquelético e cardíaco, pele e anexos (células da bainha do folículo piloso), dentes (odontoblastos), fígado, pâncreas, rins (células progenitoras), testículos (células de Sertoli e intersticiais), adrenais, sangue do cordão umbilical e outros. 

Portanto, a nestina não é limitada ao sistema nervoso e não pode ser interpretada como marcador exclusivo de células de origem neuroepitelial. Nestina pode ocorrer em tecidos sadios e em eventos patológicos. Nestina em células de adultos indicaria estado indiferenciado, plasticidade, aumento da mobilidade, ou condições patológicas. 

Nestina em tumores sólidos e em linhagens celulares deles derivadas (Krupkova et al). 
Algumas células cancerosas têm feições semelhantes às de células que ocorrem em mamíferos durante a embriogênese, entre elas, a expressão de filamentos intermediários. Nestina foi detectada em vários tipos de tumores neurogênicos e de outras origens. É o filamento intermediário típico de precursores neuronais e miogênicos, expressa em células tumorais e em células endoteliais de vários tipos de tumores neuroepiteliais, especialmente nos originados de células precursoras indiferenciadas. 

Tumores do SNC.  Em tumores astrocitários, nestina foi demonstrada no citoplasma e correlaciona-se com o grau de malignidade e invasividade da neoplasia.  Em astrocitomas fibrilares, pilocíticos e astrocitoma subependimário de células gigantes (graus I ou II da OMS) a expressão é fraca. É forte em gliomas de alto grau (III ou IV), como astrocitomas e oligodendrogliomas anaplásicos e glioblastomas. Foi também confirmada em tumores originados em precursores indiferenciados em vários locais do sistema nervoso central, como meduloblastomas, neuroblastomas, retinoblastomas e tumores neuroectodérmicos primitivos ou PNETs. 

Tumores fora do SNC.  Fora do sistema nervoso central, nestina citoplasmática foi demonstrada em nevos melanocíticos benignos e em melanomas malignos, sendo que sua expressão correlaciona-se com o fenótipo maligno destes.  Foi detectada em tumores estromais do trato gastro-intestinal (GISTs) e schwannomas, mas leiomiomas foram negativos. Foi positiva em sarcomas, tanto ósseos como de tecidos moles, tumores germinativos (germinoma, coriocarcinoma, carcinoma embrionário e tumor do saco vitelínico, mas não em teratomas maduros) e adenocarcinomas pancreáticos e mamários. Expressão de nestina tem sido associada com tumores mais invasivos e de pior prognóstico. 

Em vasos, nestina foi detectada só em células endoteliais em proliferação, e por isso pode ser um valioso marcador de neovascularização em condições fisiológicas e patológicas.  É expressa em células endoteliais de tumores neuroectodérmicos em geral, tumores epiteliais e tumores germinativos. 

Fontes. 

• Gilyarov AV. Nestin in central nervous system cells. Neurosci Behav Physiol 38: 165-9, 2008.
• Krupkova O Jr, Loja T, Zambo I, Veselska R. Nestin expression in human tumors and tumor cell lines. Neoplasma 57: 291-8, 2010.

A  mesma marcação diferenciada já demonstrada acima com GFAP,  VIM e nestina é também nítida com proteína S-100. Nesta, a positividade é nuclear e citoplasmática. 

Ou NCAM, ou molécula de adesão de células neurais (neural cell adhesion molecule), é um marcador neuronal / neuroendócrino. Aqui marca parte das células tumorais, também com notável regionalização, como visto nos antígenos acima.  A diferença é que as ilhotas de células fusiformes e de textura frouxa são negativas, enquanto as células arredondadas em arranjo mais compacto são as positivas (padrão inverso ao dos marcadores anteriores). 

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