Neupatimagem-UNICAMP

Glioblastoma multiforme de mesencéfalo e região pineal. 1. Esfregaço, congelação, parafina HE

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Fem. 60 a. Para história clínica, ressonância magnética, imunohistoquímica, clique.

Destaques da microscopia.

Esfregaço. Células de aspecto astrocitário com marcadas atipias, espalhadas na superfície da lâmina	Congelação. Corte de material a fresco obtido em criostato - aspecto semelhante, com mitose atípica	Parafina. Cortes após inclusão do tecido em parafina, melhor detalhe citológico


Atipias nucleares acentuadas, hipercromatismo, perda da relação núcleo-citoplasma	Mitoses, muitas atípicas	Proliferação endotelial dos capilares, com espessamento da parede e redução da luz


GFAP. Positivo no citoplasma dos astrócitos neoplásicos. Na foto, pseudoinclusão intranuclear	Mitoses	Proliferação endotelial dos capilares salientada pela negatividade para GFAP.


VIM. Positivo no citoplasma dos astrócitos neoplásicos	CD34. Positivo na face luminal das células endoteliais, evidencia as irregularidades dos capilares do tumor	CD34. Positivo em padrão membrana em algumas células neoplásicas, inclusive várias em mitose.


Ki-67. Positivo em cerca de 30% dos núcleos	Ki-67. Mitoses. Núcleos marcados aos pares	p53. Positivo em raros núcleos. Mitoses negativas

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ESFREGAÇO

Esfregaço do material a fresco durante o ato cirúrgico é rápido e simples para uma primeira impressão sobre a natureza do tumor. Um fragmento de cerca de 1 mm3 é espremido entre duas lâminas com deslizamento da de cima sobre a de baixo, ambas apoiadas sobre a bancada para firmeza. O tecido espalhado sobre a lâmina de baixo é imediatamente fixado em álcool absoluto e corado por HE. A lâmina de cima geralmente não fornece material aproveitável. Nem todo espécime se presta a esfregaços. Material de consistência firme, como tecido fibroso ou cartilaginoso, não produz bons preparados. Os melhores são tecidos moles, como habitual nos gliomas.

Em aumento fraco, observamos neoplasia de alta celularidade, com vasos espessos revestidos por manguitos de células tumorais. Em campos onde o tecido ficou melhor espalhado, é possível detalhe citológico, que demonstra a natureza glial do tumor.

Características citológicas. Em campos em monocamada, as células têm feições astrocitárias, com citoplasma róseo por vezes abundante, que emite prolongamentos multidirecionados. Estes se mesclam na característica rede fibrilar de fundo dos gliomas. Muitas células têm aspecto globoso, em vidro fosco e núcleos periféricos, lembrando astrócitos gemistocíticos. Há marcadas atipias nucleares, multinucleação, e pelo menos uma mitose atípica. Essas feições, mais a proliferação endotelial (vasos espessos) permitem já no esfregaço o diagnóstico de glioma de alto grau (mínimo grau III da OMS).

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CORTES DE CONGELAÇÃO

Corte de congelação.

Enquanto se examina o esfregaço, o técnico obtém cortes congelados em criostato, que geralmente permitem avançar no diagnóstico.

Tanto o esfregaço como os cortes de congelação devem ser tentados. Quando a amostra é diminuta, preferimos o esfregaço, pois nem sempre os cortes são favoráveis.

No presente caso, o corte de congelação foi bem sucedido, mesmo sendo o espécime pequeno. Confirmou os achados do esfregaço, com as aberrações citológicas e nucleares. A morfologia astrocitária das células, inclusive com formas gemistocíticas, ficou evidente. Notou-se ainda uma mitose atípica.

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PARAFINA - HE

O corte de parafina é o que permite preparados de melhor qualidade, mas leva ao menos um dia para ficar pronto.

Atipias. Observam-se multinucleação, discariose, hipercromasia, perda da relação núcleo-citoplasma. Várias células têm núcleos periféricos e citoplasma róseo abundante, lembrando astrócitos gemistocíticos.

Mitoses. Eram abundantes e na maioria atípicas. Observam-se desalinhamento dos cromossomos na placa metafásica, cromossomos 'perdidos' fora da placa e mitoses multipolares, com desorganização total do aparelho mitótico. Estas mitoses acarretam deleção de cromossomos ou segmentos deles, comprometendo irreversivelmente o genoma. Algumas células resultantes serão inviáveis e sofrem apoptose. Outras podem ser ainda mais agressivas e 'descontroladas' que as células que lhes deram origem, levando a piora progressiva e inexorável da malignidade do tumor.

Proliferação vascular. A proliferação das células endoteliais leva a empilhamento das mesmas, com espessamento da parede, redução da luz vascular e vasos com mais de uma luz. As anormalidades vasculares são também demonstradas por CD34, que marca a face luminal dos vasos, e por GFAP, que destaca os astrócitos, deixando os vasos em negativo. Apesar da proliferação vascular, não foram observadas áreas de necrose no presente espécime, provavelmente por conta do pequeno tamanho.

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Agradecimentos. Histologia HE - técnicos do laboratório de rotina - Viviane Ubiali, Mariagina de Jesus Gonçalves e Maria José Tibúrcio. Preparações imunohistoquímicas pelos técnicos Thainá Milena Stela de Oliveira e Luis Felipe Billis. Depto de Anatomia Patológica, FCM-UNICAMP.

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