Neupatimagem-UNICAMP

Linfoma de grandes células B primário de dura-máter com extensão extracraniana. 2. IH

IMUNOHISTOQUÍMICA

CD20.

Este marcador de linfócitos B é positivo na membrana plasmática das células atípicas do linfoma, definindo-o como de linhagem ou imunofenótipo B. Mesmo em algumas células em mitose ou em apoptose é possível observar marcação.

Marcação de células do linfoma. As células linfomatosas são reconhecidas pelo núcleo volumoso, atípico, de forma irregular, não raro com nucléolo. Formas binucleadas são comuns. CD20 decora a membrana celular, contornando o citoplasma e delimitando a célula das vizinhas e do interstício. Células negativas são provavelmente linfócitos T e macrófagos.

Mitoses. Muitas figuras de mitose ocorrem em células marcadas por CD20 e são vistas nas várias fases. A maioria são metáfases, com algumas anáfases e telófases.

Célula em anáfase.

Os cromossomos atingiram os polos celulares, mas a divisão do citoplasma ainda não ocorreu. Todo o contorno da célula está salientado por CD20.

Célula em telófase.

Os cromossomos atingiram os polos celulares e a divisão do citoplasma já ocorreu, notando-se a membrana de separação das células na região equatorial, realçada por CD20.

Macrófagos. Aparecem como células grandes, com citoplasma volumoso e claro, que pode conter material fagocitado (ver quadro abaixo). O núcleo tem cromatina delicada e bem distribuída, diferindo das células neoplásicas. A membrana dos macrófagos não marca para CD20. Estas células são positivas para CD68 no citoplasma.

Corpos apoptóticos. Alguns macrófagos englobam corpúsculos densamente basófilos contendo material CD20+. Interpretamos estes como corpos apoptóticos, resultado da degeneração de células do linfoma. Os corpos basófilos seriam resultantes da condensação da cromatina. A membrana marcada por CD20 indica que se trata de células de imunofenótipo B, portanto, pertencentes ao tumor.

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CD3. Este marcador de linfócitos T foi positivo em muitos pequenos linfócitos em áreas reativas. Nas áreas neoplásicas, estes linfócitos T eram raros, predominando as células neoplásicas, que são de imunofenótipo B, portanto, negativas para CD3.

Áreas reativas. Nestas, não há apenas linfócitos T (CD3+), mas estes estão mesclados a outras células, como linfócitos B reativos (CD20+) e macrófagos.	Áreas de linfoma. Aqui predominam as células neoplásicas CD3 negativas, mas alguns linfócitos T esparsos estão misturados às células atípicas. São de tamanho menor que estas.

Interface entre áreas reativas e neoplásicas.

Áreas neoplásicas B em detalhe. Comparação entre células não neoplásicas T e neoplásicas B. Nas fotos da fileira logo abaixo, no centro do campo, temos um linfócito T normal (ou reativo), não neoplásico, com sua membrana plasmática marcada por CD3. Comparar com as células em torno, negativas para CD3 - são neoplásicas, irregulares, com núcleos pleomórficos, e quase todas bem maiores que o linfócito T central. Nas outras fotos, mais comparações entre os dois tipos de células.

Áreas neoplásicas em detalhe. Mitoses, apoptose. As células em mitose, portanto neoplásicas, são todas negativas para CD3. Lembrar que são positivas para CD20 (portanto de imunofenótipo B, quadros acima). O mesmo se diga dos corpos apoptóticos: todos os observados eram CD3 negativos.

CD68. Marcador de macrófagos, destaca estas células pela forte positividade citoplasmática.

Ki-67. Marcação de alta proporção dos núcleos, atestando a rápida proliferação das células tumorais. As mitoses são fortemente positivas, com marcação também do citoplasma.

Mitoses.

Nesta célula em final de mitose (anáfase ou telófase), os cromossomos chegaram aos polos da célula e o citoplasma ainda não se dividiu. Notar a positividade citoplasmática para Ki-67.

Macrófagos. Como esperado, não apresentam marcação por Ki-67, sugerindo que, na grande maioria, não estão em preparação para divisão.

Caso do Serviço de Neurocirurgia do Hospital Santa Casa de Limeira, gentilmente contribuído pelos Drs. Antonio Augusto Roth Vargas, Marcelo Senna Xavier de Lima, Paulo Roland Kaleff e residentes. Limeira, SP.