Neupatimagem-UNICAMP

Astrocitoma pilocítico de vermis cerebelar na 8a. década Microscopia eletrônica

Procedimento. Fragmentos de cerca de 1 mm. de maior diâmetro foram retirados do espécime enviado em formol, refixados em líquido de Karnovsky (glutaraldeído a 3% e paraformaldeído a 1% em tampão cacodilato 0,07 M) e ácido ósmico a 1%, contrastados em bloco com acetato de uranila durante a noite, desidratados em acetona e incluídos em Araldite. Cortes semifinos com 1 mm de espessura foram corados em azul de toluidina a 1% para seleção dos blocos. Cortes ultrafinos do melhor bloco, com 0,1 mm de espessura, foram obtidos com navalha de diamante, montados em telas de cobre e corados em citrato de chumbo de Reynolds para exame num microscópio eletrônico Zeiss EM-10 a 60 kV. Os campos foram fotografados em filme IBF (chapas 8,3 x 10,2 mm). Após revelação, os negativos foram fotografados com câmara digital diretamente num negatoscópio em resolução 1280 x 960 pixels. As imagens resultantes foram processadas usando os softwares Microsoft Photoeditor e Jasc Paintshop Pro 7.0.

Agradecimentos às Sras Geralda Domiciano de Pádua e Marilúcia Ruggiero Martins pelos preparados de microscopia eletrônica.

Aspecto geral. Como antecipado dos estudos com HE e imunohistoquímica, o tumor era constituído por células astrocitárias densamente fibrilares. Os filamentos intermediários intracitoplasmáticos tinham arranjo em feixes e se dispunham nos corpos celulares e nos prolongamentos orientados em todas as direções.

Qualidade do preparado. Como se tratava de material fixado inicialmente em formol por vários dias, a preservação da ultraestrutura estava abaixo do ideal. Não se observavam bem as membranas plasmáticas das células e a cromatina era grumosa e não bem distribuída. Mesmo assim, várias organelas eram reconhecíveis. Os filamentos intermediários, que são elementos do citoesqueleto constituídos pelas proteínas GFAP e vimentina, mostravam-se bem conservados.

Gotículas citoplasmáticas. Estas pequenas e abundantes estruturas arredondadas, de aspecto e diâmetro homogêneos, freqüentemente limitadas por membrana única, foram consideradas como mais provavelmente gotículas lipídicas. Uma outra possibilidade seria lisossomos. Foram observadas em grande parte das células.

Filamentos citoplasmáticos eram a feição predominante nestes astrócitos. Pelos dados da imunohistoquímica, eram compostos predominantemente por GFAP (inset embaixo e à E) e vimentina. Retículo endoplásmico rugoso com ribossomos era notado também em várias células.

Vasos e espaços perivasculares. Os abundantes vasos do tumor, que chegavam a formar pseudoglomérulos, eram separados entre si por tecido conjuntivo frouxo, rico em fibras colágenas e no chamado colágeno de longo espaçamento, ou corpos de Luse, vistos também nos corpos de Verocay de schwannomas. As células endoteliais tinham citoplasma delgado e algumas mostravam fenestrações. As células astrocitárias do tumor apresentavam-se revestidas por membrana basal na face voltada para o colágeno perivascular, um aspecto já descrito nos astrocitomas pilocíticos (Uematsu et al, 1989) mas especialmente saliente em ependimomas (Uematsu et al, 1988).

Uematsu Y, Hirano A, Llena JF. Electron microscopic observations of blood vessels in ependymoma [in Japanese]. No Shinkei Geka 16: 1235-42, 1988.
Uematsu Y, Hirano A, Kawano H, Llena JF. The astrocyte-endothelial interface in cerebellar astrocytoma [in Japanese]. No Shinkei Geka 17: 999-1004, 1989.

Relação entre astrócito e capilar ilustrada com um inset de tricrômico de Masson. Os prolongamentos astrocitários não chegam até a célula endotelial, mas sim terminam no colágeno perivascular, delimitados por uma camada única de membrana basal.

Tecido perivascular compõe-se de fibras colágenas finas (provavelmente reticulínicas) e colágeno de longo período, de longo espaçamento ou corpos de Luse (todos termos sinônimos).

Relação entre membrana da célula tumoral e membrana basal. Em certas áreas havia íntimo embricamento entre prolongamentos elaborados e tortuosos das células tumorais e membrana basal, provavelmente produzida pelas próprias. A membrana celular em contato com a membrana basal apresentava-se espessa e eletrodensa, sugerindo proteínas de adesão, como em desmossomos. Verdadeiros desmossomos ou hemidesmossomos não foram encontrados.

Caso do Serviço de Neurocirurgia da Santa Casa de Limeira, gentilmente contribuído pelos Drs. Paulo Roland Kaleff, Marcelo Senna Xavier de Lima, Luiz Gustavo da Cunha Peixoto e Antonio Augusto Roth Vargas.