Neupatimagem-UNICAMP

Glioblastoma de células gigantes.
5. Araldite - Azul de Toluidina

Página de resumo do caso.

....

Destaques dos cortes de Araldite - azul de toluidina.

Infiltração da substância branca por células neoplásicas.	Axônios mielínicos.	Células neoplásicas englobando restos axonais.


Células neoplásicas gigantes multinucleadas.	Células neoplásicas xantomatosas ou vacuoladas.	Mitoses atípicas.


Para esfregaço, cortes de congelação, cortes de parafina, imunohistoquímica (1) (2) e microscopia eletrônica deste caso, clique.

Considerações gerais. Estas fotos provêm do material incluído para microscopia eletrônica (página seguinte). O processamento é diferente do da microscopia óptica. O tecido é colhido em pequenos fragmentos (da ordem de 2 mm³ no máximo), e fixado imediatamente em líquido de Karnovsky por várias horas ou dias. Segue-se pós-fixação em tetróxido de ósmio, desidratação em acetona e inclusão em resina plástica Araldite. Os blocos são cortados em ultramicrótomo usando navalhas de vidro. Os cortes, com espessura aproximada de 1 mm, são corados com azul de toluidina em chapa quente e examinados diretamente ao microscópio óptico sem lamínula. Pode-se examinar com objetiva de imersão mediante adição de uma gota de óleo sobre o corte. Esta técnica permite os aumentos habituais de microscopia óptica, mas com grande melhora da resolução, em virtude da melhor preservação do tecido, e dos cortes serem mais finos (1 mm, contra 5 mm em material de parafina). Os preparados são rotineiramente usados para escolha dos melhores blocos e delimitação de áreas de interesse para microscopia eletrônica. Podem fazer um interessante intermediário entre a microscopia óptica de parafina e a ME.

Infiltração do tecido nervoso pelo tumor.

Feixes de axônios mielínicos da substância branca (em azul escuro), separados pelas células neoplásicas (em lilás ou roxo claro), detalhes abaixo.

Axônios mielínicos.

Aparecem como pequenas argolas em azul marinho bem forte, quase negro, que correspondem às baínhas de mielina. O axônio em si é a parte mais clara no centro da argola. As células neoplásicas penetram entre os axônios separando-os, por vezes individualmente. Para imagens destes campos em microscopia eletrônica, clique.

Axônios mielínicos. Variam muito de tamanho, e seu contorno, embora arredondado, é freqüentemente irregular. O axônio propriamente dito é a parte clara central. Às vezes aparece bem claro, como que vazio. Na realidade, são axônios anormais ou em sofrimento, pois se encontram na margem da neoplasia, comprimidos e separados uns dos outros pelas células tumorais. Para detalhes da patologia axonal em microscopia eletrônica, clique.

....

Célula neoplásica com axônio no citoplasma.

Em microscopia eletrônica, várias células continham estruturas lembrando figuras de mielina sem axônio. Há evidência ultraestrutural sugestiva de que as células neoplásicas, ao avançar pelo tecido, poderiam englobar axônios viáveis ou degenerados no seu citoplasma.

Células neoplásicas gigantes e multinucleadas.

Aparecem em roxo claro, e variam muito em tamanho e forma. As maiores chamam a atenção pelo grande pleomorfismo, com núcleos volumosos, disformes, nucléolos proeminentes e citoplasma freqüentemente vacuolado. Detalhes em microscopia eletrônica.

Células vacuoladas.

Como melhor detalhado em microscopia eletrônica, parece haver duas variedades de vacúolos. Os maiores, como na célula ao lado, são irregulares e poderiam conter líquido aquoso ou proteico. Os menores, mais regulares, e que aparecem levemente azulados com azul de toluidina, poderiam ser de natureza lipídica.

Estas são meras suposições, pois não foi feita coloração para lípides no material fixado e não processado, devido à exiguidade da amostra.

Células em mitose. Na grande maioria, as mitoses são atípicas, com os cromossomos condensados dispersos ao acaso pelo citoplasma. Há também mitoses tripolares ou multipolares. Para mitoses em microscopia eletrônica, clique.

Preparações de microscopia eletrônica pelas técnicas, Sras. Marilúcia Ruggiero Martins e Geralda Domiciana de Pádua. A elas, nossos agradecimentos.

Para mais imagens deste caso:
Página de resumo do caso e texto: glioblastoma de células gigantes.	TC e RM	Esfregaço e cortes de congelação	Parafina - HE


IH : GFAP, VIM, S-100, NF	IH : CD34, Ki67, p53	Araldite - azul de toluidina	Microscopia eletrônica