Neupatimagem-UNICAMP

Criptococoma em hemisfério cerebral.
2. Colorações especiais em cortes de parafina

Colorações especiais. Masc., 34 a. Clique para história clínica, TC, RM, espécime macro, histologia de parafina : lâminas escaneadas, HE, PAS, Grocott, mucicarmim; esfregaço do fixador com fungos em suspensão : HE, PAS, Grocott, Giemsa, Papanicolaou, tinta nanquim; microscopia eletrônica. Textos : parede celular e cápsula mucopolissacarídica.

O material, riquíssimo em criptococos, foi estudado com colorações especiais nos cortes histológicos (nesta página), e em esfregaços do líquido fixador onde ficaram armazenadas as reservas de tecido . Abaixo, os resultados em cortes com PAS, Grocott e mucicarmim.

PAS.

A reação histoquímica do ácido periódico e reativo de Schiff para grupos açúcar (para procedimento técnico, clique) demonstra o corpo celular do fungo em cor magenta forte e a cápsula polissacarídica em róseo. Realça os parasitas contra o tecido de fundo e dá detalhes dos limites entre cápsulas de fungos vizinhos nos aglomerados. Células em reprodução são também elegantemente demonstradas.

A positividade para o PAS decorre da composição química rica em açúcares complexos, tanto da parede celular quanto da cápsula. Clique para detalhes.

PAS. Fungos em brotamento.

PAS. Limites entre fungos vizinhos.

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Grocott.

A técnica da metenamina-prata para fungos (para procedimento, clique) demonstra os parasitas como silhuetas em negro por impregnação argêntica do corpo celular. A cápsula polissacarídica fica incolor. O método permite forte destaque dos microorganismos, facilitando reconhecimento de formas em brotamento. A contracoloração com verde-luz situa os fungos em relação às células do tecido.

Grocott. Fungos em reprodução. Como esperado, a maioria dos exemplos de reprodução ocorre por brotamento simples. Porém, não é raro identificar-se brotamento múltiplo, em geral como dois brotos. Estes por vezes imitam a clássica 'orelha de Mickey' associada ao Paracoccidioides brasiliensis.

Grocott. Fungos fagocitados por macrófagos. Alguns macrófagos chegavam a abrigar muitos fungos, até mesmo formas em brotamento. Para microscopia eletrônica de fungos fagocitados, clique.

Grocott suave.

Os fortes contrastes gerados pela técnica de Grocott podem ser suavizados reduzindo a permanência das lâminas na solução de prata. Na nossa experiência, cerca de 10 minutos a 60°C são suficientes, sendo necessário controle da impregnação sob microscópio. Os tons intermediários do procedimento 'suave' melhoram os detalhes da parede celular dos fungos.

Grocott suave. Fungos em reprodução.

Grocott suave. Fungos fagocitados por macrófagos.

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Mucicarmim.

O carmim é uma tintura derivada de pequenos insetos parasitas de cactos e originados do México. Para detalhes, acessar Wikipedia (1) (2). Para procedimento técnico da coloração clique.

O mucicarmim cora grupos polissacarídicos, sendo usado para demonstração de glicogênio (carmim de Best). É de grande valia na pesquisa de criptococos, onde cora tanto a parede celular como a cápsula.

Mucicarmim. Caráter radiado da cápsula polissacarídica. Uma feição dos criptococos melhor observada com mucicarmim é a textura frouxa, fibrilar e radiada da cápsula mucopolissacarídica. Esta característica, notada só em alguns parasitas, passa despercebida com PAS e Grocott, mas é muito proeminente em microscopia eletrônica, ajudando a compreender a penetração da tinta Nanquim na cápsula.

Mucicarmim. Fungos em reprodução.

Mucicarmim. Fungos e macrófagos. Nas partes profundas do espécime era comum observar-se fungos e macrófagos xantomatosos lado a lado. No quadro abaixo, vários fungos aparecem no interior do citoplasma dos fagócitos.

Mucicarmim. Fungos fagocitados por macrófagos.

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Agradecimentos. Caso gentilmente contribuído pelos Drs. Antonio Augusto Roth Vargas, Marcelo Senna Xavier de Lima, Paulo Roland Kaleff e residentes Marco Aurélio Moscatelli Alvarenga, Cícero Ronaldo Ferreira da Silva, Sinval Malheiros Pinto Neto, e José Alberto Pereira Pires, Hospital Santa Casa de Limeira, Limeira, SP. Colorações especiais pelo técnico, Sr. Sérgio Roberto Cardoso. Departamento de Anatomia Patológica, FCM-UNICAMP.

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Para mais imagens deste caso:
TC, RM	Macro, HE	Colorações especiais - parafina	Colorações especiais - esfregaço	Microscopia eletrônica