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Tumor embrionário com neurópilo abundante e
rosetas em multicamadas. 3. IH para antígenos neuronais - NF, SNF, MAP2, NeuN

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Fem. 2a 2m. Clique para TC, RM, macro, HE, destaques da IH, GFAP, VIM, NF, SNF, MAP2, NeuN, EMA, Ki67, microscopia eletrônica, texto.

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NF. Proteína de neurofilamento (NF) é um filamento intermediário do citoesqueleto expresso por neurônios em seu corpo celular e prolongamentos, dendritos e axônios. Neste tumor embrionário do SNC, neurofilamento demonstra numerosas células esparsas entre as células neoplásicas que, pela sua topografia e ampla distribuição, foram interpretadas como diferenciação neuronal. A morfologia das maiores é indiscutivelmente de neurônios. Há, porém, ampla variação da quantidade de citoplasma demonstrada por NF. Isto indicaria graus diversos de diferenciação neuronal.

NF. Células indiferenciadas. As células indiferenciadas com apenas núcleos corados em azul não expressam o antígeno.

NF. Diferenciação neuronal incipiente. Em meio às células indiferenciadas é possível observar-se células pequenas positivas no citoplasma. Algumas são redondas e outras apresentam prolongamentos citoplasmáticos curtos e rudimentares. O núcleo pode assumir aspecto semelhante ao dos neurônios maduros, com cromatina frouxa e nucléolo evidente. As células são primitivas demais para serem pré-existentes. São consideradas exemplos de diferenciação neuronal incipiente em um tumor totipotente, que pode originar astrócitos (ver GFAP, VIM), neurônios e células ependimárias (ver EMA).

NF. Diferenciação neuronal avançada. Estas células mostram diferenciação neuronal mais evidente e são facilmente reconhecíveis pelo formato piramidal, prolongamentos dendríticos e núcleo com nucléolo. Mais uma vez, a disposição casual e anárquica fala fortemente contra sua pré-existência. Vale notar também a grande quantidade de prolongamentos celulares NF positivos, presumivelmente axônios, que permeia o neurópilo. Dado o grande volume do tumor, é extremamente improvável que pertençam à substância branca original. O corolário é que devem corresponder às células tumorais com diferenciação neuronal.

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SNF. Sinaptofisina, uma proteína participante de vesículas sinápticas (para breve texto, clique), marcou extensamente este tumor primitivo nas áreas que na HE se assemelham a neurópilo. As áreas de células indiferenciadas, caracterizadas por núcleos azuis e escasso citoplasma, são negativas. A riqueza da marcação sugere abundância de sinapses ou de prolongamentos celulares portadores da proteína.

SNF. Células indiferenciadas. Grupamentos de células indiferenciadas e rosetas de Flexner são negativas para sinaptofisina. Em algumas destas chama a atenção um grande número de células em apoptose. Os fragmentos nucleares destacam-se em azul escuro.

SNF. Diferenciação neuronal avançada. Neurônios de aspecto maduro derivados de diferenciação das células tumorais destacam-se devido aos botões sinápticos que decoram sua membrana externa, realçando o contorno do corpo celular e dendritos.

Corpúsculos SNF-positivos. Em poucas áreas observam-se coleções destes corpúsculos fortemente SNF positivos. Não foram observados correspondentes em HE ou outras reações imunohistoquímicas. Poderiam corresponder a acúmulos de material intraaxonal, como as 'bolas de retração de Cajal' em axônios seccionados, ou aos 'axônios em contas de rosário' vistos em tumores que infiltram o tecido nervoso.

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MAP2. Proteína associada a microtúbulos (microtubule associated protein, para breve texto clique) é um dos melhores anticorpos para estudar a morfologia e arquitetura de neurônios. A marcação é citoplasmática (núcleos negativos) no corpo celular e porção proximal dos dendritos. Aqui, endossa os resultados de outros marcadores neuronais, como NF, SNF e NeuN. As células indiferenciadas são negativas. Em meio a elas é possível discernir células imaturas, com diferenciação neuronal incipiente, citoplasma escasso sem prolongamentos ou estes são curtos.

MAP2. Células indiferenciadas e diferenciação neuronal incipiente.

MAP2. Diferenciação neuronal avançada. Aqui as células adquirem prolongamentos e o contorno se aproxima do de neurônios maduros, geralmente células piramidais. Nucléolos tendem a ser mais evidentes.

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NeuN. NeuN (neuronal nuclei, para breve texto clique), um anticorpo específico para neurônios maduros, marca neurônios no córtex cerebral adjacente ao tumor. Na foto abaixo, observam-se os neurônios em cima, com positividade nuclear e citoplasmática. As células neoplásicas avançam das camadas inferiores, sem limite nítido. A marcação dos neurônios corticais serve de controle interno positivo para a reação.

NeuN. Infiltração cortical. Os neurônios piramidais do córtex são aqui vistos em meio às células neoplásicas.

NeuN. Diferenciação neuronal no tumor. Áreas profundas do tumor, longe do córtex cerebral, apresentam células esparsas positivas para NeuN, na maioria só no citoplasma. No córtex, a marcação é geralmente nuclear e citoplasmática. Estas células foram interpretadas como diferenciação neuronal das células tumorais. A topografia delas, dispersas pelo tumor e distantes da superfície, elimina a possibilidade de serem pré-existentes. O achado corrobora os de outros marcadores.

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Agradecimentos. Caso contribuído pelo Centro Infantil Boldrini, de Campinas, SP. Cortes histológicos - Aparecido Paulo de Moraes, Irineu Mantovanelli Neto. Imunohistoquímica: Adriana Worschech, Isabella Guize (Boldrini); Ana Claudia Sparapani Piaza, Luzia Aparecida Magalhães Ribeiro Reis e Arethusa de Souza (Depto de Anatomia Patológica da FCM-UNICAMP), Campinas, SP.

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