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Ganglioglioma de componente glial pilocítico em cerebelo. 4. Imunohistoquímica.

Destaques da imunohistoquímica.

GFAP, padrão pilocítico. Prolongamentos astrocitários em paralelo, fibras de Rosenthal	GFAP, padrão protoplasmático. Prolongamentos astrocitários esparsos, muitas células não marcadas.	VIM. Padrão semelhante ao GFAP.


S-100. Positividade nuclear e citoplasmática, variável	SNF. Positividade em neurônios e axônios	Cromogranina. Positividade em neurônios


NF. Positividade em neurônios e axônios	CD34. Vasos proliferados, pseudoglomérulos.	Ki-67. Positividade em núcleos isolados.

GFAP - Padrão pilocítico. Áreas de padrão pilocítico do tumor mostram prolongamentos astrocitários positivos para GFAP, espessos e densamente arranjados em feixes. As fibras de Rosenthal, abundantes nestas regiões, destacam-se como corpúsculos homogêneos onde a periferia se marca para GFAP, mas não o centro.

Fibras de Rosenthal são abundantes nas áreas deste ganglioglioma que têm estroma glial de padrão pilocítico. Aparecem como corpúsculos de textura homogênea, com periferia fortemente positiva e centro negativo para GFAP. Isto se deve a que na periferia encontram-se filamentos intermediários (no caso, GFAP e vimentina) e o centro é formado por outra proteína, a alfa B-cristalina. Para breve texto sobre esta, clique. Para fibras de Rosenthal deste caso em microscopia eletrônica, clique.

GFAP - Padrão protoplasmático. Áreas de padrão protoplasmático são bem mais celulares, mas a quantidade de prolongamentos astrocitários positivos para GFAP é menor. Entre eles, há algumas células marcadas no citoplasma, que se podem aceitar como astrócitos neoplásicos. Já várias outras células não se marcam e sua natureza fica incerta. Hipóteses incluem neurônios ou oligodendrócitos. Os neurônios, contudo, são minoria a julgar pelos marcadores SNF, cromogranina e NF, abaixo. Vasos hialinizados aparecem como estruturas tortuosas não marcadas.

Astrócitos. A marcação citoplasmática para GFAP identifica estas células como astrócitos constituintes deste tumor (ganglioglioma de estroma pilocítico). Atipias nucleares e multinucleação são comuns.

Corpos hialinos e hialino-granulosos. Vários destes se marcam para GFAP difusamente, sugerindo origem astrocitária. Em alguns, a marcação é apenas periférica, sendo o centro negativo, como já observado com as fibras de Rosenthal, acima. Para corpos hialino-granulosos em microscopia eletrônica, clique.

VIM. Com vimentina, os resultados são muito semelhantes aos com GFAP. Há positividade de uma parcela das células neoplásicas (que interpretamos como astrócitos) e de seus prolongamentos, deixando grande parte das células sem marcação (só o núcleo é visível, corado por hematoxilina, o corante de fundo).

VIM - Astrócitos. As células marcadas no citoplasma pelo anticorpo contra vimentina lembram em tudo aquelas demonstradas por GFAP (quadros anteriores), apoiando a interpretação de que sejam de linhagem astrocitária. A rigor, porém, vimentina é um filamento intermediário inespecífico, ubiquitário, e não define por si só o tipo de uma célula. As aberrações nucleares, multinucleação e pleomorfismo citoplasmático são notáveis.

VIM. Vasos. Os vasos hialinizados destacam-se como imagens negativas (não marcadas), exceto pela fina camada de células endoteliais que margeia as luzes vasculares. O colágeno que forma as paredes espessadas é negativo.

S-100. Observa-se positividade nuclear e citoplasmática para proteína S-100 em grande parte, mas não na totalidade das células tumorais.

SNF. A positividade citoplasmática para sinaptofisina, um marcador de neurônios, identifica algumas das células do tumor como de linhagem neuronal, permitindo o diagnóstico de ganglioglioma, já suspeitado em HE pela morfologia destas células.

SNF. Neurônios. A morfologia das células marcadas é heterogênea. Algumas lembram muito neurônios, como demonstrados em HE, com citoplasma abundante de limites precisos, por vezes com prolongamentos, e núcleo com cromatina frouxa e nucléolo proeminente. Outras são variavelmente anômalas, revelando multinucleação, ausência de nucléolo e vacúolos citoplasmáticos. Nestas formas aberrantes, apenas a marcação para SNF indica a natureza neuronal da célula. Além dos corpos celulares dos neurônios, há vários axônios transitando pelo tumor, freqüentemente com aspecto 'em contas de rosário', habitual em axônios em degeneração.

Cromogranina. Resultados com cromogranina superpõe-se aos com sinaptofisina e os reforçam. Há marcação de células esparsas com evidente morfologia neuronal e anomalias semelhantes às observadas com SNF, como vacuolização citoplasmática.







Cromogranina. Corpo hialino granuloso. Este corpúsculo elíptico no estroma tumoral tem morfologia semelhante aos corpúsculos hialinos granulosos já demonstrados em HE e com GFAP. Contudo, a positividade para cromogranina, um marcador de neurônios e células neuroendócrinas, sugere linhagem neuronal.

NF. Marcação para neurofilamento, um filamento intermediário específico de neurônios, demonstra corpos celulares e axônios esparsos em meio ao componente glial do tumor.

NF - Neurônios.


NF - Axônios. Alguns apresentam aspecto 'em contas de rosário' (expansões localizadas e em série), habitualmente associadas a axônios patológicos.

CD34. Este marcador de endotélio ilustra a grande variabilidade dos vasos tumorais. Muitos são proliferados, tortuosos, hialinizados, com luzes amplas e irregulares, e paredes espessas e colageneizadas. Outros são simples, com diâmetro regular e ramificações dicotômicas.

Ki-67. Há marcação de poucos núcleos no tumor, calculada como da ordem de 1% pela análise de vários campos (em estimativa visual, sem contagem). É de interesse que muitas das células mais atípicas ou multinucleadas não se marcam, indicando que não estão no ciclo de divisão celular. A marcação é notada em núcleos isolados, geralmente de células mononucleadas, com morfologia de astrócitos, não de neurônios.

Caso do Serviço de Neurocirurgia do Hospital Centro Médico de Campinas, gentilmente contribuído pelos Drs. Antonio Augusto Roth Vargas, Marcelo Senna Xavier de Lima, Paulo Roland Kaleff e residentes. Campinas, SP.