Criptococoma em hemisfério cerebral. 
2. Colorações especiais em cortes de parafina 
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Colorações especiais.  Masc., 34 a.  Clique para história clínica, TC, RMespécime macro, histologia de parafina : lâminas escaneadas, HE, PAS, Grocott, mucicarmim; esfregaço do fixador com fungos em suspensão : HE, PAS, Grocott, Giemsa, Papanicolaou, tinta nanquim; microscopia eletrônica. Textos : parede celular e cápsula mucopolissacarídica

O material, riquíssimo em criptococos, foi estudado com colorações especiais nos cortes histológicos (nesta página), e em esfregaços do líquido fixador onde ficaram armazenadas as reservas de tecido .  Abaixo, os resultados em cortes com PAS, Grocott e mucicarmim

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PAS.   

A reação histoquímica do ácido periódico e reativo de Schiff para grupos açúcar (para procedimento técnico, clique) demonstra o corpo celular do fungo em cor magenta forte e a cápsula polissacarídica em róseo. Realça os parasitas contra o tecido de fundo e dá detalhes dos limites entre cápsulas de fungos vizinhos nos aglomerados. Células em reprodução são também elegantemente demonstradas. 

A positividade para o PAS decorre da composição química rica em açúcares complexos, tanto da parede celular quanto da cápsula. Clique para detalhes. 
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PAS.  Fungos em brotamento. 
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PAS.  Limites  entre  fungos  vizinhos. 
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Grocott. 

A técnica da metenamina-prata para fungos (para procedimento, clique) demonstra os parasitas como silhuetas em negro por impregnação argêntica do corpo celular.  A cápsula polissacarídica fica incolor. O método permite forte destaque dos microorganismos, facilitando reconhecimento de formas em brotamento. A contracoloração com verde-luz situa os fungos em relação às células do tecido. 

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Grocott.  Fungos em  reprodução.   Como esperado, a maioria dos exemplos de reprodução ocorre por brotamento simples. Porém, não é raro identificar-se brotamento múltiplo, em geral como dois brotos. Estes por vezes imitam a clássica 'orelha de Mickey' associada ao Paracoccidioides brasiliensis
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Grocott.  Fungos fagocitados por  macrófagos.  Alguns macrófagos chegavam a abrigar muitos fungos, até mesmo formas em brotamento. Para microscopia eletrônica de fungos fagocitados, clique. 

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Grocott  suave. 

Os fortes contrastes gerados pela técnica de Grocott podem ser suavizados reduzindo a permanência das lâminas na solução de prata. Na nossa experiência, cerca de 10 minutos a 60°C são suficientes, sendo necessário controle da impregnação sob microscópio.  Os tons intermediários do procedimento 'suave' melhoram os detalhes da parede celular dos fungos. 

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Grocott suave.  Fungos em  reprodução. 
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Grocott suave.  Fungos fagocitados por  macrófagos.
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Mucicarmim. 

O carmim é uma tintura derivada de pequenos insetos parasitas de cactos e originados do México. Para detalhes, acessar Wikipedia (1) (2).  Para procedimento técnico da coloração clique

O mucicarmim cora grupos polissacarídicos, sendo usado para demonstração de glicogênio (carmim de Best). É de grande valia na pesquisa de criptococos, onde cora tanto a parede celular como a cápsula. 

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Mucicarmim.  Caráter radiado da cápsula polissacarídica.   Uma feição dos criptococos melhor observada com mucicarmim é a textura frouxa, fibrilar e radiada da cápsula mucopolissacarídica.  Esta característica, notada só em alguns parasitas, passa despercebida com PAS e Grocott, mas é muito proeminente em microscopia eletrônica, ajudando a compreender a penetração da tinta Nanquim na cápsula
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Mucicarmim.  Fungos  em  reprodução. 
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Mucicarmim.  Fungos e macrófagos.    Nas partes profundas do espécime era comum observar-se fungos e macrófagos xantomatosos lado a lado. No quadro abaixo, vários fungos aparecem no interior do citoplasma dos fagócitos. 
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Mucicarmim.  Fungos  fagocitados por  macrófagos. 
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Agradecimentos. Caso gentilmente contribuído pelos Drs. Antonio Augusto Roth Vargas,  Marcelo Senna Xavier de Lima, Paulo Roland Kaleff e residentes Marco Aurélio Moscatelli Alvarenga, Cícero Ronaldo Ferreira da Silva, Sinval Malheiros Pinto Neto, e José Alberto Pereira Pires, Hospital Santa Casa de Limeira, Limeira, SP.   Colorações especiais pelo técnico, Sr. Sérgio Roberto Cardoso.  Departamento de Anatomia Patológica, FCM-UNICAMP. 
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Para mais imagens deste caso:
TC, RM Macro, HE Colorações especiais - parafina Colorações especiais - esfregaço Microscopia eletrônica
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Mais sobre criptococose : Peças: SN-45, SN-41, SN-42 Lâmina A. 279B Imagem Texto de apoio Banco de imagens Criptococose pulmonar Outras neuromicoses Imagem, Patologia
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