O fragmento menor à D, proveniente de outro caso, mostra a evolução do calo cartilaginoso para ósseo, ou seja, demonstra basicamente ossificação encondral. Com o tempo, o calo cartilaginoso seria totalmente substituído por tecido ósseo neoformado, e este  por tecido ósseo maduro ou lamelar que caracterizaria o calo ósseo definitivo (esta última fase não é demonstrada aqui).

 
O calo provisório é uma lesão exuberante, exofítica, que envolve a área fraturada e faz saliência para os tecidos moles adjacentes (músculo esquelético). O calo cartilaginoso leva no mínimo 15 dias, e pode precisar até de 30  a 60 dias para formar-se. Nas figuras abaixo, notar o aspecto anárquico dos condrócitos, que não estão orientados em fileiras como na cartilagem epifisária normal. Vários condrócitos têm aspecto ativo, com núcleos maiores que o habitual. 

 
Na fratura há geralmente necrose de fragmentos ósseos por ruptura de vasos. Esses fragmentos, chamados seqüestros, caracterizam-se pela falta de osteócitos, melhor notada pela falta de núcleos nas lacunas onde estas células estão alojadas. No fragmento ósseo observado acima há uma parte de osso viável, onde se notam os núcleos de osteócitos, e outra onde não há núcleos, constituindo portanto osso necrótico ou seqüestro. Os seqüestros são removidos a partir da periferia pela ação de osteoclastos, que são macrófagos especializados, freqüentemente multinucleados. 

 
NO PAR DE FOTOS ACIMA, O MESMO TECIDO  DE  GRANULAÇÃO  ORIGINA CARTILAGEM À ESQUERDA E  OSSO À DIREITA (OSSIFICAÇÃO  MEMBRANOSA).  O CAPILAR MARCADO COM ASTERISCO É O MESMO NAS DUAS FOTOS. ISTO ILUSTRA O CARÁTER PLURIPOTENCIAL DAS CÉLULAS MESENQUIMAIS IMATURAS QUE COMPÕEM O TECIDO DE GRANULAÇÃO. 

 
Na primeira fase da ossificação membranosa, as células imaturas do tecido de granulação se diferenciam em osteoblastos e passam a sintetizar matriz óssea, que consiste de fibras colágenas e proteoglicanas de constituição química adequada a receber sais de cálcio.  As fibras colágenas se dispõem em feixes orientados em várias direções. Com a mineralização, passam a formar o osso imaturo ou woven bone (pode traduzir-se por osso 'trançado', devido à distribuição irregular das fibras na matriz). 

 
Numa  segunda fase, o osso imaturo será aparado por osteoclastos, e novas etapas de ossificação vão se seguir através  de osteoblastos dispostos em uma camada na superfície da nova trabécula óssea. O limite entre a matriz óssea já existente e a recém depositada é nítida e chamada linha cementante. Após vários ciclos de deposição e remoção chega-se ao calo ósseo definitivo, que será constituído por  osso lamelar ou maduro (fase esta não atingida no presente material).

 
DEPOSIÇÃO  DE  MATRIZ  ÓSSEA  POR  OSTEOBLASTOS.   Os osteoblastos depositam matriz óssea na superfície da nova trabécula. Têm núcleo volumoso e nucléolo evidente, demonstrando ativa síntese proteica. O citoplasma tende a acidófilo devido à riqueza em filamentos intermediários (também estes material proteico). À medida que sintetizam matriz são envolvidos por ela e incorporados à trabécula, passando a chamar-se osteócitos. Os osteócitos são menores, têm núcleo mais compacto que o dos osteoblastos, e ficam alojados em pequenas cavidades no seio da matriz óssea.

 
AÇÃO  DE  OSTEOCLASTOS.  Os osteoclastos continuamente aparam e desbastam as trabéculas neoformadas. Sua ação faz contraponto com a dos osteoblastos, permitindo a moldagem das novas trabéculas segundo as linhas de força.  Os osteoclastos são atraídos por mediadores químicos sintetizados pelos próprios osteoblastos. Assim, quando aumenta a quantidade de osteoblastos aumentam também os osteoclastos. 

 
ALTERAÇÕES  DEGENERATIVAS  NA  CARTILAGEM.  Na ossificação encondral observada em uma fratura, tecido cartilaginoso é substituído por tecido ósseo imaturo. O processo é semelhante ao observado na placa epifisária durante o crescimento de ossos longos. Porém, nesta última, as células cartilaginosas estão orientadas em colunas. No calo cartilaginoso de uma fratura as células estão desordenadas.  No início da ossificação encondral há deposição de cálcio na matriz cartilaginosa. Isto prejudica a nutrição dos condrócitos, que degeneram. Seus núcleos ficam picnóticos, e sofrem cariolise. 

 
AÇÃO  DE  OSTEOCLASTOS.   A matriz cartilaginosa parcialmente calcificada e restos necróticos de condrócitos são removidos por osteoclastos. 

 
SUBSTITUIÇÃO  DA  CARTILAGEM   POR  OSSO  NEOFORMADO. Simultaneamente à remoção da cartilagem degenerada, os osteoblastos depositam matriz óssea, como já visto na ossificação membranosa (acima).